全能核酸酶 CAS 9025-65-4
基本信息
CAS(化学文摘登记)号
9025-65-4
中文名称
全能核酸酶
EC号
3.1.30.2
中文别称
超级核酸酶
绿豆核酸酶
内-核酸成核酶
简化分子线性输入规范(SMILES)
CCn1cc(c(=O)c2c1nc(cc2)C)C(=O)O
StdInChI
InChI=1S/C12H12N2O3/c1-3-14-6-9(12(16)17)10(15)8-5-4-7(2)13-11(8)14/h4-6H,3H2,1-2H3,(H,16,17)
StdInChIKey
MHWLWQUZZRMNGJ-UHFFFAOYSA-N
分子式
C12H12N2O3
分子量
232.235
EINECS号
222-159-7
贝尔斯坦(Beilstein)注册号
没有数据
MDL编号
MFCD00131010
物理性质
外观
无色液体
安全信息
危险品运输编号
非危险品
德国水污染物质分类清单(WGK Germany)
2
全能核酸酶 CAS号 9025-65-4 EC 3.1.30.2 的详细规格和其他相关信息
活性定义
在37℃,pH 8.0条件下,在30分钟内使△A260 值降低1.0(相当于完全消化37 μg DNA)的酶量定义为一个活性单位。
测试方法
聚丙烯酰胺凝胶电泳; 分子排阻高效液相色谱法
纯度
≥99%
pH
8.0
蛋白比活力
≥1.0×106 U/mg
等电点
6.85
最适温度
37℃
辅因子
1-10mM Mg2+
储存缓冲液
20mM pH 8.0 三羟甲基氨基甲烷盐酸盐, 2mM 氯化镁, 20mM 氯化钠, 50% (V/V)甘油
包装
5KU,25KU,50KU,100KU,1MU,5MU
保质期
2年
保存条件
-20℃保存,避免冻融,储存2年活力不低于90%
优势
超级核酸酶纯度高,宿主蛋白残留低,无动物源性,稳定大批量生产。
用途
UltraNuclease是一种广谱核酸酶,又称全能核酸酶,是来源于Serratia Marcescens,经过基因工程改造的核酸酶。它可以降解所有形式的DNA和RNA,包括单链、双链、线状、环状、天然以及变性的核酸,将它们消化成3-8个碱基长度的5’单磷酸寡核苷酸,且不具有碱基识别特异性,水解速度DNase I的34倍,是金黄色葡萄球菌核酸酶的4倍,是生物行业首选核酸去除酶制剂。
酶学性质和推荐使用条件
检测项目 | 最佳反应条件 | 有效反应条件 | 反应谱图 |
温度 | 37℃ | 0-45℃ | |
pH | 8.0–9.0 | 6.0–11.0 | |
Mg2+ | 1–2mM | 1–15mM | |
二硫苏糖醇(DTT) | 0–100mM | >100mM | |
2-巯基乙醇 | 0–100mM | >100mM | |
一价阳离子浓度(Na+、K+等) | 0–20mM | 0–200mM | |
PO43-浓度 | 0–10mM | 0–100mM |
全能核酸酶的清除
阴离子交换层析 | 切向流过滤 |
回收重组蛋白类目标产物 | 回收病毒疫苗等大分子目标产物 |
1.推荐DEAE、TMAE层析柱; 2.全能核酸酶等电点6.85,不能被吸附。 | 1.推荐300 kD膜包,全能核酸酶分子量29 kD; 2.以浓缩病毒疫苗为例,超滤5个体积全能核酸酶的清除率达99.5%. |
全能核酸酶的残留检测
全能核酸酶残留检测试剂盒是检测和定量重组病毒载体和疫苗制剂中残余全能核酸酶杂质的高灵敏度和高特异试剂盒。试剂盒检测限度为0.2 ng/mL.
参数 | 性能 |
背景值(450 nm) | ≤0.2 |
检测范围 | 0.2-20 ng/mL |
检测限度 | 0.2 ng/mL |
CV | 批内分析3.6–5.1% 批间分析2.9-4.3% |
回收率 | 92–103% |
抗干扰性 | 标准溶液含4mg/ml的BSA |
标准曲线不受大肠宿主蛋白、酵母宿主蛋白、小鼠血清蛋白、 BSA等杂蛋影响。
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